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細(xì)胞處理方法


細(xì)胞處理方法
一、         貼壁細(xì)胞
1.    接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.    用75%的酒精**(建議配置75%的酒精的水是**過的)。
3.    嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.    將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.    用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.25%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.    1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.    換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
二、         懸浮細(xì)胞
1.    接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.    用75%的酒精**(建議配置75%的酒精的水是**過的)。
3.    嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.    細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5.    1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
6.    換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2培養(yǎng)。

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