1. 選擇培養(yǎng)基沒有一定的標準,某種培養(yǎng)基可以適合多種細胞,某種細胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長。但是,建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞優(yōu)選的培養(yǎng)基??梢圆殚唴⒖嘉墨I,或在購買細胞株時咨詢。
2. 1640的確是非常便宜的培養(yǎng)基,也很好用。但是,它的緩沖力*弱,所以有時會對細胞的生長狀態(tài)有影響,尤其是一些實驗室長期傳代狀態(tài)不好的細胞。有條件還是用DMEM培養(yǎng)基。
3. 一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和***時,放入4度冰箱。應該在2到3周內用完它。因為,一些***和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。2-3周后就降解完了。
4. 培養(yǎng)基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈拋物線增長,當碳酸氫鈉加到一定量時,pH變化越來越小。而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加,呈直線增長,碳酸氫鈉量越大,滲培養(yǎng)基變成了高滲溶液,細胞會脫水萎縮滴。 (ATCC 推薦大部分細胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L)
5. 胎牛 血清必須貯存于–20 ~ -70℃,若存放于4℃,2~3周就降解了??蓪?瓶500ml的血清,每次40~45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中。
6. 血清的解凍和細胞的解凍正相反:細胞是越快越好;血清是越慢越好。血清解凍步驟: -20℃或–70℃冰箱拿出來,放到4℃冰箱,放**,慢慢融化。
7. 進口的胎牛血清,一般不需要熱滅活,因為會造成沉淀物顯著增多,且會影響血清的品質。這些沉淀物在顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常誤以為是血清遭受污染。